为进一步提高相关肿瘤诊疗规范化水平，保障医疗质量与安全，国家卫生健康委员会组织对原发性肺癌等18个肿瘤病种诊疗规范进行了修订，形成了相关肿瘤诊疗规范（2018年版）。

康录生物将对这些肿瘤诊疗规范中涉及FISH检测的相关内容进行解析，今天为大家分享成人急性髓系白血病诊疗规范(2018年版)相关内容。

急性髓系白血病(Acute myeloid leukemia，AML)是髓系造血干/祖细胞恶性疾病。以骨髓与外周血中原始和幼稚髓性细胞异常增生为主要特征，临床表现为贫血、出血、感染和发热、脏器浸润、代谢异常等，多数病例病情急重，预后凶险，如不及时治疗常可危及生命。目前，化疗、靶向药物和造血干细胞移植仍是AML治疗的主要手段。

临床上白血病的分类主要有两大标准，一个是FAB标准，临床重要性逐渐下降。另一诊断分型标准是较新的WHO标准，见表1。WHO将原始细胞≥20%作为急性白血病的诊断标准。将AML和ALL的细胞形态学-免疫学-细胞遗传学-分子生物学特征纳入，形成了MICM分型。其中染色体核型和分子生物学检查主要用于检查白血病的遗传学异常，用于诊断分型和预后评估，见表2。

  

预后危险度分层中可以看到t(8:21)(q22;q22.1)（AML1/ETO）作为预后良好的因子，那么AML1/ETO阳性急性髓系白血病生物学特性是怎样的呢？

急性粒细胞白血病（部分分化型）M2b髓象

急性髓系白血病M2b形态学和免疫表型表明，细胞核浆发育不平衡现象实际是胞核，胞质的多种蛋白形成紊乱造成的。有研究发现AML1/ETO与这种蛋白紊乱的现象有联系。该研究还发现，基因水平的异常比细胞水平的异常出现的更早、更广泛。因此，基因检测在AML1/ETO阳性急性髓系白血病中非常重要。美国国立综合癌症网络NCCN肿瘤临床实践指南推荐FISH作为AML1/ETO检测方法。

接下来，我们来看一个AML1/ETO阳性急性髓系白血病误诊病例：

初诊：骨髓增生异常综合征-难治性贫血伴原始细胞增多(MDS-RAEB)

胸骨骨髓像: 取材涂片染色良好，骨髓增生活跃，其中粒系60.5%，红系26.0%，粒系比例及形态未见明显异常，原始粒细胞0.5%。红系以中晚幼红细胞增生为主，形态未见明显异常。

骨髓像显示:增生活跃，粒系比例及形态未见明显异常，

可见中晚幼红细胞(Wright×1000)

最终诊断：急性髓系白血病伴t(8;21)

采用FISH检测AML1/ETO为阳性。如伴有此基因异常，即使骨髓中原始细胞＜20%，也应诊断为AML，而不是MDS-RAEB。如该患者未行骨髓染色体检测，则可能出现持续误诊。

FISH检测AML1/ETO为阳性

因此，为避免对AML1/ETO类患者进行误诊，应在骨髓细胞形态学检测基础上行常规性骨髓病理检测及染色体检测，如发现异常，则进一步行流式细胞免疫分型及相关基因检测。只有综合细胞形态学、免疫学、细胞遗传学和分子生物学分型，才能避免误诊的发生。

预后危险度分层中还看到t（15；17）（q22；q12）（PML/RARA）作为预后不良的因子。急性早幼粒细胞白血病(APL)是急性白血病中病情十分凶险的一种类型，有10%～20%的患者死于早期出血，大约60%的患者发生弥漫性血管内凝血（DIC）。

APL是白血病中对诱导分化治疗反应较好的一种类型，这与APL细胞中表达的维甲酸受体（RARα）融合蛋白诱导的染色质的改变有关, APL中90%的患者出现特异性染色体t（15；17）（q22；q12）改变；1986年中国学者在国际上首次使用全反式维甲酸诱导分化治疗APL并获得了成功，维甲酸对肿瘤细胞的作用机制与化疗药物不同，它通过促进APL细胞的分化纠正出凝血机制的异常，避免化疗所致的骨髓抑制和诱发DIC的可能，使白血病的治疗出现了重大的突破，使APL的预后大为改观。

所以，染色体t（15；17）（q22；q12）改变为APL特异的分子标志物，使用FISH技术对PML/RARA进行检测是血液科的常规手段，PML/RARA融合基因存在一个非常特殊的融合形式：RARA基因出现一个小片段的断裂，与PML基因发生融合。

传统探针中包含重复序列，造成：

1. 荧光背景高，掩盖小断裂片段；

2. 杂交特异性低，不能区分杂点和目标点；

3. 杂交敏感度低，不能准确检出小断裂片段。

FastProbe®快速FISH探针不含重复序列：

1. 特异性高，不与非目标片段结合；

2. 敏感度高，有效检出小断裂片段；

3. 荧光信号强，不会被背景色和PML信号遮挡；

4. 荧光背景和杂讯低，不容易掩盖微弱信号。

FastProbe^®快速PML/RARA FISH结果图

除了以上优势外，APL发病急、进展快，及时有效的治疗就显得尤为重要。而快速检测是进行及时治疗的首要条件，FastProbe®快速FISH探针能实现2小时快速杂交，早上拿到样本下午下班之前就能阅片完毕，能有效提高检测效率。同时快速FISH探针在出现需要复检的情况时能迅速完成，最低程度降低患者等待结果的时间。

AML是髓系造血干/祖细胞恶性疾病，多数病例病情急重，预后凶险，如不及时治疗常可危及生命。分子遗传学检测主要用于检查白血病的遗传学异常，能有效的用于诊断分型和预后评估，以下是AML中常见的分子遗传学检测项目。

 

总之，快速、精准、全面的检测方法，及时有效的治疗方案是保证AML患者受益的不可或缺的先决条件。